一、采购项目名称及内容
采购人:广西壮族自治区疾病预防控制中心;
采购项目名称:免疫规划检测项目测序服务;
项目编号:--(重);
资金来源:财政资金。
二、项目内容
(一)菌株全基因组测序:次。
.样本类型:纯化后的灭活细菌。
.提取:采用或的方法对样本的基因组 进行提取,之后利用琼脂糖凝胶电泳检测 的纯度和完整性,利用进行定量。
.文库构建: 经电泳检测合格的 样品用 超声波破碎仪随机打断成长度约为的片段。处理完成后的片段,使用 ®™ (, )试剂盒,经末端修复、加尾、加测序接头、纯化、扩增等步骤完成整个文库制备。
.文库检测:文库构建完成后,先使用 . 进行初步定量,稀释文库至 /,使用 对文库的插入片段进行检测, 符合预期后,使用 - 方法对文库的有效浓度进行准确定量,以保证文库质量。
.测序和交付平台:使用 上机测序,运行智能化交付系统和自动化样本库系统;
.数据质量:原始下机数据测序质量要求: ≥%,≥%;
.数据量: ≥/样本;
.数据交付:需要交付 ;
.周期要求:需要保证项目可加急得到响应,二代测序仪充足≥台;
.生物信息学分析内容:
① 原始下机数据处理:过滤测序质量值低的,保留高质量,得到 ;
② 样品组装: 进行基因组组装,得到能反映样品基因组基本情况的序列文件,并对组装结果进行评价;
③ 基因组组分分析 组装完成后,分析样品基因组的成分,包括编码基因、非编码、重复序列、前噬菌体、基因岛、等基因组成分的预测;
④ 功能注释 针对编码基因序列进行不同数据库的功能注释,包括常用的、数据库、针对病原微生物的数据库;
⑤ 基因组比较分析 此步骤从基因组、基因两层面分别比较样品与参考基因组的差异,包括共线性分析、基因家族构建、共有/特有基因分析、物种进化树构建。
(二)一代测定服务:....
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